Immunofluorescence Analysis of Estrogen and Progesterone Receptors and Ki-67 Nuclear Protein in Canine Uteri Treated with Medroxyprogesterone Acetate During Anestrus / Análisis de Inmunofluorescencia de Receptores de Estrógeno y Progesterona y Proteína Nuclear Ki-67 en Úteros Caninos Tratados con Acetato de Medroxiprogesterona Durante el Anestr

SUMMARY: Estradiol and progesterone receptors play an essential role in the changes occurring in the uterus during the estrus cycle in dogs (Canis lupus familiaris). In order to investigate the potential effect of progestational agent medroxyprogesterone acetate (MPA) when is used during anestrus on the expression of estradiol receptors [ER], progesterone receptors [PR] and nuclear protein Ki67, we evaluated uterine tissue immunohistochemically. Uteri were grouped as nulliparous (control, n=11), multiparous (n=11) and treated with MPA (n=11; nulliparous with two treatments; 5mg/kg; i.m.). The amount and location of PR, ER and Ki67 were studied on the epithelial surface, apical and basal regions of the endometrium and myometrium using immunohistochemical techniques with a spectral confocal microscope and analyzed by ANOVA. Differences in ER were observed between the multiparous and MPA-treated groups in the apical region of the endometrium (p=0.0022). Differences in cell proliferation were detected between the nulliparous and multiparous groups (p=0.0037) and nulliparous and MPA-treated groups (p=0.0003) in the basal region of the endometrium. In conclusion, two doses of MPA (5mg/kg; i.m.) do not have a significant effect on the expression of ER and PR; however, they inhibit cell proliferation in the basal region of the endometrium, which includes the stroma, subepithelial cell layer, compact layer, and spongy layer. The clinical and long-term effect of this treatment should be evaluated in subsequent studies.

Los receptores de estradiol y progesterona juegan un rol fundamental en los cambios que se producen en el útero durante el ciclo estral de las perras (Canis lupus familiaris). El objetivo de este estudio fue evaluar las expresiones de ER-a y PR en el útero y la proliferación de células endometriales detectando la expresión nuclear de la proteína Ki67 en perras expuestas a la progestina sintética MPA y compararlas con perras nulíparas y multíparas expuestas a progesterona luteal. Úteros fueron agrupados como nulíparas (control, n=11), multíparas (n=11) y tratadas con MPA (n=11; nulíparas con dos tratamientos; 5 mg/kg; i.m.). La expresión de PR, ER-a y Ki67 fue evaluada en la regiones apicales y basales del endometrio y miometrio con un microscopio confocal espectral. Se observó diferencias en ER-a entre los grupos multíparas y tratados con MPA en la región apical del endometrio (p=0,0022). Se detectaron diferencias en la proliferación celular entre los grupos de nulíparas y multíparas (p=0,0037) y los grupos de nulíparas y tratados con MPA (p=0,0003) en la región basal del endometrio. En conclusión, dos dosis de MPA (5mg/kg; i.m.) no tienen un efecto significativo sobre la expresión de ER y PR; sin embargo, inhiben la proliferación celular en la región basal del endometrio, el cual incluye a estroma, capa de células subepiteliales, estratos compacto y esponjoso. El efecto clínico a largo plazo de este tratamiento debe ser evaluado en estudios posteriores.

Olfactory stimulus as environmental enrichment for shelter dogs: a pilot study / Estímulo olfativo como enriquecimento ambiental para cães de abrigo: um estudo piloto

Environmental enrichment techniques include olfactory stimuli for improving animal welfare. This study aimed to analyze the reactions of 41 shelter dogs exposed to odorous stimuli, such as the method used in another study on wild canids. The focal animal method analyzed the dogs' reactions, with all behaviors recorded. Behavioral responses were classified as positive (P+), negative (N-), or other (Ot). Independent variables were all dogs and the size of the packs. The behavior between the basal (without stimulus), exposure, and after-stimulus withdrawal was analyzed. For all dogs, olfactory stimuli significantly increased P+ (P=0.001) and N- (P=0.004), contrasting with the decrement of Ot behaviors (P=0.001) from the basal to the exposure phase. After the withdrawal of the stimuli, P+, N-, and Ot behaviors returned to basal levels (P>0.05). There were no significant differences (P>0.05) in the conduct of small or large packs exposed to stimuli. Dogs are sensitive to olfactory stimuli, but arousal is generalized to P+ and N-. It is undesirable to an N- increase for improvement of animal welfare. Contrary to what was observed in a study with wild canids, the method failed in shelter dogs because N- was increased. The introduction of sudden novelty (olfactory stimulus) in an impoverished shelter environment may have caused excitement in the dogs. It is suggested that changes in the method, such as stimuli exposition to each dog in an isolated room, are necessary to increase sheltered dog well-being.(AU)

As técnicas de enriquecimento ambiental incluem estímulos olfativos para aumentar o bem-estar animal. O objetivo deste estudo foi analisar as reações de 41 cães de abrigo expostos a estímulos odoríferos, como o método utilizado em outro estudo com canídeos selvagens. As reações dos cães foram analisadas pelo método animal focal, com todos os comportamentos registrados. As respostas comportamentais foram classificadas como positivas (P+), negativas (N-) ou outras (Ot). As variáveis independentes foram todos os cães e o tamanho das matilhas. Foi analisado o comportamento entre o basal (sem estímulo), exposição e após a retirada do estímulo. Para todos os cães, os estímulos olfativos aumentaram significativamente P+ (P=0,001) e N- (P=0,004), contrastando com a diminuição dos comportamentos Ot (P=0,001) da fase basal para a de exposição. Após a retirada dos estímulos, os comportamentos P+, N- e Ot retornaram aos níveis basais (P>0,05). Não houve diferenças significativas (P>0,05) no comportamento de matilhas pequenas ou grandes expostas a estímulos. Os cães são sensíveis a estímulos olfativos, mas a excitação parece ser generalizada para ambos, P+ e N-. É indesejável um aumento de N- para melhoria do bem-estar animal. Ao contrário do que foi observado em um estudo com canídeos selvagens, o método falhou em abrigar cães porque o N- foi aumentado. A introdução de uma novidade repentina (estímulo olfativo) em um ambiente de abrigo empobrecido, pode ter causado excitação exagerada nos cães. Sugere-se alterações no método, como a exposição de estímulos a cada cão em uma sala isolada necessária para aumentar o bem-estar do cão abrigado.(AU)

High level of serovar copenhageni detection in dog sera from Patrocínio, MG, Brazil / Alto nível de detecção do sorovar copenhageni em soros de cães de Patrocínio, MG, Brasil

This study aimed to evaluate the occurrence of canine leptospirosis and the possible risk factors associated with the disease in the municipality of Patrocínio, MG, Brazil. A cross-sectional observational study was carried out from July through August 2017. The municipality was divided into four regions (north, south, east and west) and a predefined number of neighborhoods (25) were randomly sampled in each region. Samples of blood serum were collected from 241 domiciled male and female dogs of different breeds and ages. To investigate the risk factors for canine leptospirosis, the owners of the animals were asked to fill out an epidemiological questionnaire. The following factors were evaluated: breed, sex, age, presence of rodents, type of diet, access to the street, vaccination, presence of flooded areas, and educational level of the owners. Blood serum samples were evaluated by the Microscopic Agglutination Test (MAT), using a collection of 24 live antigens. Of the 241 dogs evaluated, 32 (13.2%) were reactive. The most frequent serovars were: Copenhageni (37.5%) and Canicola (21.8%), followed by Icterohaemorrhagiae and Grippotyphosa (12.5%), Pomona, Tarassovi and Butembo (9.3%) and Hardjo (6.2%). The presence of canine leptospirosis was associated with purebred dogs (OR=0.3059 [95% CI: 0.1430 ­ 0.6547]) and vaccination (OR=2.581 [95% CI: 1.198 ­ 5.563]). It was concluded that some dogs in the municipality of Patrocínio, MG have anti-Leptospiraspp. antibodies and that the serovars most frequently identified were Copenhageni (37.5%) and Canicola (21.8%). Pure breeds and vaccination were factors associated with the prevalence of infection.

O objetivo deste estudo foi avaliar a ocorrência da leptospirose canina e os possíveis fatores de riscos associados à doença no município de Patrocínio ­ MG. Foi realizado um estudo observacional transversal, durante os meses de Julho à Agosto de 2017. O município foi divido em quatro regiões (norte, sul, leste e oeste) e um número predefinido de bairros (25) foi amostrado aleatoriamente em cada região. Foram colhidas 241 amostras de soro sanguíneo de cães domiciliados de ambos os sexos e de diferentes raças e idades. Para investigação dos fatores de risco da leptospirose canina foi aplicado um questionário epidemiológico aos tutores dos animais, foram avaliados os fatores: raça, sexo, idade, presença de roedores, tipo de dieta, acesso à rua, vacinação, presença de áreas alagadas, terrenos baldios e grau de escolaridade dos tutores. As amostras de soro sanguíneo foram avaliadas pelo exame de Soroaglutinação Microscópica (SAM), com uma coleção de vinte e quatro antígenos vivos. Dos 241 cães avaliados, 32 (13,2%) apresentaram-se reagentes. Os sorovares de maior frequência foram: Copenhageni (37,5%) e Canicola (21,8%), seguido por Icterohaemorrhagiae e Grippotyphosa (12,5%), Pomona, Tarassovi e Butembo (9,3%) e Hardjo (6,2%). A presença de leptospirose canina foi associada em cães com raça definida (OR = 0,3059 [IC 95%: 0,1430 ­ 0,6547]) e vacinação (OR = 2,581 [IC 95%: 1.198 ­ 5.563]). Concluiu-se que existem cães que apresentam anticorpos anti-Leptospira spp., no município de Patrocínio-MG e que os sorovares Copenhageni (37,5%) e Canicola (21,8%) foram os de maior ocorrência. Apresentar raça definida e a vacinação foram fatores associados à prevalência da infecção.

Quantification of collagen fibers in canine uteri treated with medroxyprogesterone acetate

Collagen plays essential roles in remodeling uterine tissue during decidualization, implantation, pregnancy and involution. To understand whether the progestational agent medroxyprogesterone acetate (MPA) can modify the organization and deposit of collagen in the uteri of normal bitches (Canis Tlupus familiaris), we assessed uterine tissues by histochemistry. Uteri were grouped as: nulliparous (n=11), multiparous (n=11) and treated with MPA (n=11; nulliparous with two treatments; 5mg/kg; i.m.). The amount, location and birefringence of interstitial collagen types I and III in the fold and base of the endometrial stroma and the myometrial muscular layers were studied on sections stained with Picrosirius Red by polarized light microscopy and evaluated by ANOVA. No differences were observed in the endometrium. In the myometrium, differences were observed in collagen type I between MPA-treated and nulliparous uteri vs. multiparous (p<0.05), and differences in collagen type III between nulliparous and multiparous uteri vs. MPA-treated (p=0.0001). In conclusion, two doses of MPA had no significant effect on the investigated collagens in the extracellular matrix.(AU)

Splenic congestion associated with acepromazine administration in dogs / Congestão esplênica associada à aplicação de acepromazina em cães

The effects splenic dilatation induced by acepromazine in a prospective, randomized study. Thirtythree adult mongrel dogs were divided into two groups designated as AG (acepromazine 0.05 mg/kg, i.v., n = 23) and CG (0.9 percent sodium chloride administered at a similar volume, n = 10). In both groups underwent sonographic examinations before (T0) and fifteen minutes (T15) after drug injection. The thickness spleen and splenic vein width were measured. Higher thickness was found in the AG group at T15 (2.47 cm) when compared to that at T0 (2.06 cm, p = 0.016), while the T0 (2.33 cm) and T15 (2.39 cm) measures did not differ within the CG group. Moreover, the splenic vein width was higher (p = 0.013) at T15 than at T0 in the AG group. Based on results of this study, we concluded that acepromazine, in doses of 0.05 mg/kg, promotes splenomegaly in dogs after fifteen minutes of the injection.

Foram avaliados os efeitos de dilatação esplênica induzidos pela acepromazina em estudo do tipo prospectivo e randomizado. Trinta e três cães foram distribuídos em dois grupos designados como GA (acepromazina 0,05 mg/kg, i.v., n = 23) e GC (solução de cloreto de sódio 0,9 por cento em volume semelhante ao GA, i.v., n = 10). Em ambos os grupos foi realizada ultrassonografia abdominal previamente à aplicação das substâncias (T0) e após 15 minutos (T15). A espessura do baço e a largura da veia esplênica foram mensuradas. Foi verificada maior espessura esplênica no GA no T15 (2,47 cm) quando comparado a T0 (2,06 cm, p = 0,016), enquanto no GC não houve diferença significativa, sendo T0 (2,33 cm) e T15 (2,39 cm). Ainda, a largura da veia esplênica foi maior no T15 (p = 0,013) comparado a T0no GA. Baseado nos resultados encontrados, pode-se concluir que a acepromazina na dose de 0,05 mg/kg induz a esplenomegalia em cães após 15 minutos da aplicação.

Domestic dogs in rural area of fragmented Atlantic Forest: potential threats to wild animals / Cães domésticos em uma área rural fragmentada da Mata Atlântica: ameaça potencial para os animais selvagens

Domestic dogs' skills such as hunting and herding shifted as man migrated from rural areas to developing urban centers and led to a change in human-dog relationship and in the purpose of these animals in the properties. The countryside of Viçosa is characterized by small coffee farms surrounded by borders with fragments from the Brazilian Atlantic Forest. The close proximity of these environments favors the encounter between domestic and wild animals which may lead to dog attacks to wild animals and, consequently, disease transmission. The aim of this study was to understand the role of dogs in the rural environment and assess the possible risks they offer to native fauna. The data were obtained from structured questionnaires answered by dogs' owners from rural Viçosa. Results regarding the socioeconomic status of the owners revealed that the majority belonged to either the middle class or low educational level categories. In addition, it was observed that there is a preference for male dogs due to its guard activity and that most dogs live unconstrained. Even though most dogs are provided with good food management, 58% of them prey on wildlife. However, more than half of the dogs do not consume their prey which can be explained by the inherited ability of artificial selection but 36.5% of them have scavenger diet. Most of the dogs were immunized against rabies, whereas, only 28.8% were immunized against infectious diseases such as leptospirosis, distemper and parvovirus. In conclusion, the management of dogs by rural owners, mainly unrestrained living, and allied to inadequate vaccination coverage suggest that dogs are predators of Viçosa's rural wildlife and potential disseminators of disease.

As habilidades dos cães domésticos como caçadores e pastores modificaram com a mudança do homem das áreas rurais para os centros urbanos em desenvolvimento, levando para uma mudança nas relações humanos-cães e o propósito desses animais nas propriedades. O município de Viçosa é caracterizado por pequenas fazendas com cafeicultura, cercadas nas bordas por fragmentos de Mata Atlântica. A proximidade desses ambientes favorece o encontro entre animais domésticos e selvagens, que pode resultar em ataques de cães sobre a fauna e, consequentemente, levar à transmissão de doenças. O objetivo do presente estudo foi compreender o papel de cães no ambiente rural e avaliar os possíveis riscos que eles oferecem para a fauna nativa. Os dados foram obtidos aplicando-se questionários estruturados respondidos pelos proprietários de cães rurais de Viçosa. Os resultados a respeito do status socioeconômico dos proprietários revelaram que a maioria pertence à classe média e baixo nível educacional formal. Há uma preferência por cães machos, devido à atividade de guarda e a maior parte vive sem contenção. Apesar de que a maioria tenha um bom manejo alimentar, 58% dos cães predam animais selvagens. Entretanto, mais da metade dos cães não consome suas presas. A maioria dos cães foi imunizada contra a raiva, mas somente 28,8% foram vacinados contra doenças infecciosas como leptospirose, cinomose e parvovirose. Conclui-se que o manejo dos proprietários, principalmente a falta de contenção, aliada à cobertura imunoprofilática, sugere que os cães são potenciais predadores e disseminadores de doenças sobre a fauna selvagem de Viçosa.

Uso da acepromazina, dexmedetomidina e xilazina na sedação em cães: alterações hematológicas e bioquímicas

Foram avaliados os efeitos hematológicos e bioquímicos mediante a sedação com acepromazina, dexmedetomidina ou xilazina em cães. Para tanto, os animais foram distribuídos aleatoriamente em 3 tratamentos denominados GA (acepromazina 0,1 mg/kg), GD (dexmedetomidina 0,01 mg/kg) e GX (xilazina 1 mg/kg) por via i.m. Os parâmetros verificados foram eritrócitos totais, hematócrito (Ht), hemoglobina (Hb), leucócitos totais, proteínas totais, alanina transferase, aspartato transferase, albumina, fosfatase alcalina, gama-glutamil transferase, creatinina e uréia plasmática. Os dados foram coletados nos momentos T0 a T480, sendo T0 previamente a aplicação dos fármacos e o restante dos momentos 15, 30, 60, 120, 240 e 480 minutos após a aplicação dos agentes. Foi observada redução dos eritrócitos totais em todos os momentos comparados ao basal no GA. Houve redução dos valores da Hb e do Ht durante todos os momentos de avaliação comparativamente a T0 no grupo GA e GX. Houve redução significativa dos leucócitos totais nos momentos T30, T60, T120 e T240 no GA comparativamente ao momento T0; já nos grupos GD e GX os valores médios foram inferiores ao T0 nos tempos T30 e T120, respectivamente. Não foram verificadas diferenças estatisticamente significativas nas variáveis bioquímicas analisadas entre os tempos e grupos.

Caracterização de casos de agressão canina em Campinas, São Paulo, Brasil / Characterization of cases of canine aggression in Campinas, SP, Brazil

Foi realizado um estudo retrospectivo com os dados sobre casos de agressão canina notificados em 2009 em Campinas, São Paulo, Brasil. Foram obtidas informações de 87 (3,8%) entre 2.281 casos. A incidência acumulada de agressões foi de 2,42% por ano (IC95%: 2,32-2,51) para cada mil habitantes. A maior parte das vítimas de cães agressores eram homens (53,0%), adultos (72,0%) e os próprios proprietários (52,9%). Os ataques ocorreram principalmente na rua (55,2%), enquanto a vítima interagia com o cão (79,3%) e os membros superiores foram a parte do corpo mais acometi- da (49,4%). Os cães eram majoritariamente machos (74,7%), adultos (74,3%), sem raça definida (65,5%), não castrados (98,9%), domiciliados (55,2%), sem adestramento (98,1%) e a metade deles já havia causado agressão com mordedura. A agressão canina não foi atribuída a sexo, raça, estado reprodutivo, tipo de restrição, ou adestramento dos animais, pois a distribuição da frequência destas variáveis na população canina do município era desconhecida. Para desenvol- ver protocolos de prevenção de mordeduras, devem ser realizados estudos populacionais para avaliar as características e a prevalência da agressão canina.

A retrospective study was conducted with information on the cases of canine aggression notified in 2009 in the municipality of Campinas, state of São Paulo, Brazil. Information was obtained from 87 (3.8%) out of 2,281 cases. Cumulative incidence of canine aggression was 2.42% per year (CI95%: 2.32-2.51) per 1000 inhabitants. Most victims of aggressive dogs were men (53.0%), adults (72.0%), and owners (52.9%). The attacks occurred mainly in the street (55.2%), while the victim was interacting with the dog (79.3%), and the upper limbs were the most affected part of the body (49.4%). Most of these dogs were males (74.7%), adults (74.3%), mixed-breed (65.5%), not castrated (98.9%), restricted (55.2%), without training (98.1%), and half of them had already bitten. Canine aggression was not associated to sex, breed, reproductive status, type of restrain, and training, because frequency distribution of these variables among the canine population of Campinas is unknown. In order to develop preventive protocols for dog bites, populational studies assessing the characteristics and prevalence of dog aggression are needed.

Domestic dogs in Atlantic forest preserves of south-eastern Brazil: a camera-trapping study on patterns of entrance and site occupancy rates / Cães-domésticos em remanescentes de Mata Atlântica no sudeste do Brasil: padrões de entrada e de ocupação obtidos a partir de armadilhas fotográficas

Presence of exotic species in forest remnants is a major concern for the conservation of wild species, not only on islands, where potential impact is higher. Although the problem is widespread and increasing, there are few studies on Neotropical forests. Here we quantify the occurrence of domestic dogs (Canis lupus familiaris) in an Atlantic forest reserve in south-eastern Brazil (Santa Lúcia Biological Station - SLBS). Throughout two years of monitoring with camera traps (2,142 camera-days), 25 records of 16 individual dogs were obtained in the interior of SLBS, making dogs the fourth most frequently recorded species of mammals in general and the first-ranking among Carnivora, ahead of the ocelot and puma, the top two terrestrial predators present in SLBS. Dogs entered the forest year round, in almost half of the sampled months (48 percent), and predominantly during daytime (89 percent). They were detected in various trails inside the reserve, but mostly in areas nearest to the reserve's border (<200 m from the edge). Record rates of domestic dogs did not correlate significantly with climate variables, with frequency of mammal records and richness in general, or with any particular mammal species (Spearman rank correlation, p > 0.05 in all cases), suggesting an erratic, non-seasonal pattern of entrance in the reserve. Data indicate that domestic dogs can be abundant and frequent visitors to little disturbed Atlantic forest reserves even when these are located in regions of low density of human population. The potential impact to native fauna is discussed.

A presença de espécies exóticas em remanescentes florestais é um dos maiores problemas para a conservação de táxons silvestres, não apenas em ilhas, onde o impacto potencial do contato entre os grupos citados revela-se mais significativo. Apesar deste problema ser amplo e crescente, poucos são os estudos desenvolvidos em florestas Neotropicais. Neste sentido, o presente estudo objetivou caracterizar a presença de cães-domésticos (Canis lupus familiaris) em uma reserva de Mata Atlântica localizada no Sudeste do Brasil (Estação Biológica de Santa Lúcia - EBSL). A partir de dois anos de monitoramento com armadilhas fotográficas (2.142 câmeras-dia), foram obtidos 25 registros de 16 indivíduos no interior da EBSL. Com relação ao número de registros obtidos, o cão-doméstico foi a quarta espécie mais registrada, considerando a mastofauna de maneira geral, e a primeira entre os Carnivora, estando à frente da jaguatirica e da onça-parda, os dois principais predadores terrestres presentes na EBSL. Os cães-domésticos entraram na reserva durante todo o ano, apresentando registros em quase metade dos meses de amostragem (48 por cento), predominantemente ao longo do dia (89 por cento). Os espécimes foram detectados em várias trilhas no interior da EBSL, principalmente em áreas próximas à borda reserva (<200 m da borda). A taxa de registros de cão-doméstico não esteve significativamente correlacionada com variáveis climáticas, com a freqüência de registros e a riqueza de mamíferos em geral, ou com alguma espécie de mamífero em particular (Correlação de Spearman, p > 0,05 em todos os casos), sugerindo uso errático e não sazonal da reserva. Os dados obtidos indicam que os cães-domésticos podem se tornar visitantes abundantes e freqüentes em pequenos remanescentes de Mata Atlântica, mesmo quando estes estão localizados em regiões com baixa densidade populacional humana. O potencial impacto do cão-doméstico sobre a fauna silvestre é discutido.